Determination of diacetyl in workplace air by high performance liquid chromatography using 4-nitro-o-phenylenediamine as precolumn derivatization
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摘要:背景
双乙酰（DC）被广泛应用于食品调味行业，过量职业接触会引起人体严重的呼吸系统疾病，但目前对于工作场所空气中DC尚缺乏相应的国家标准检测方法。
目的建立4-硝基邻苯二胺（NPDA）柱前衍生-高效液相色谱法测定工作场所空气中DC的方法。
方法用溶液吸收法采集工作场所空气中DC，采用4-硝基邻二苯胺作为衍生化试剂。通过调整吸收液磷酸浓度，优化反应试剂比例、反应温度和时间，建立测定工作场所空气中DC的高效液相色谱方法，得到线性、检出限、定量下限等性能指标。采用相对比较法评价方法采样效率，吸收液保存试验评价样品稳定性，加标回收试验评价方法准确度和精密度，并进行干扰试验。将所建立的方法应用于实际样品检测，考察方法的适应性。
结果衍生化反应温度越高，反应时间越长，衍生化效率越高，因此选择60 ℃衍生化2 h。反应液经SB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）分离，在30 ℃柱温下，用甲醇-水（体积比：65%/35%）混合液为流动相，以1.0 mL·min−1的流速洗脱，紫外检测器（
λ max=257 nm）检测，保留时间定性，外标法定量。本法DC检测范围为5~2000 μg·L−1，相关系数为0.999 9，检出限为1.3 μg·L−1，定量下限为4.3 μg·L−1，最低检出浓度为4.3 μg·m−3，最低定量浓度为14.3 μg·m−3（以采样体积V 0=3.0 L计）。本法样品加标回收率为99.1%~100.8%，批内精密度为0.5%~3.0%，批间精密度为1.2%~2.0%。本法平均采样效率为94.5%，样品在4 ℃下至少可保存14 d，工作场所空气共存成分不干扰DC的测定。本法检测某香精生产车间空气，DC含量为5.86~8.85 mg·m−3。结论采用1.0%磷酸吸收液采集、NPDA柱前衍生-高效液相色谱法测定空气中DC，方法简单实用，准确度好，灵敏度高，DC吸收液无损失降解，可应用于工作场所空气中DC的检测。
Abstract:BackgroundDiacetyl (DC) is widely used in the food flavoring industry and excessive occupational exposure to DC can cause serious respiratory diseases. However, there is no corresponding national standard method for the determination of DC in the air of workplace.
ObjectiveTo establish a method for the determination of DC in workplace air by high performance liquid chromatography using 4-nitro-o-phenylenediamine (NPDA) as precolumn derivatization.
MethodsDC in the air of workplace was collected by solution absorption method. This experiment used NPDA as the derivatization reagent. By adjusting acidity of solution and optimizing concentration ration of DC/NPDA, derivatization temperature, and time, a method for the determination of DC in workplace air was proposed, and its performance indexes such as linearity, detection limit, and lower limit of quantification were obtained. Sampling efficiency was evaluated by relative comparison method, and sample stability was evaluated by sample preservation test. Accuracy and precision of the method were evaluated by standard addition recovery test with blank samples, and an interference test was carried out by adding standard samples. The established method was applied to actual samples to evaluate its adaptability.
ResultsA combination of 60 °C for 2 h was selected for derivatization because a higher derivatization reaction temperature and a longer reaction time associated with a higher derivatization efficiency. The solution was separated by SB-C18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) at 30 ℃, using a mixture of methanol and water (v/v, 65%/35%) as mobile phase with an elution flow rate of 1.0 mL·min−1, and was detected with a variable wavelength detector (
λ max=257 nm) by qualitative analysis based on retention time and quantitative analysis based on external standard method. In terms of the proposed method, the linear range of detection was from 5 μg·L−1 to 2000 μg·L−1, with a correlation coefficient of 0.9999, and a detection limit of 1.3 μg·L−1, the quantitative detection of the lower limit was 4.3 μg·L−1, with a sampling volumeV 0 of 3.0 L, the minimum detection concentration was 4.3 μg·m−3, and the minimum quantitative concentration was 14.3 μg·m−3. The recovery rate was 99.1%-100.8%, the intra-batch precision was 0.5%-3.0%, and the inter-batch precision was 1.2%-2.0%. The average sampling efficiency of this method was 94.5%, and the sample could be stored at 4 °C for at least 14 d. The coexisting components in the air of the workplace did not interfere with the determination of DC. The DC content in the air of a flavor workplace was 5.86-8.85 mg·m−3.ConclusionA determination method for DC in workplace air by high performance liquid chromatography using NPDA as precolumn derivatization after being collected by 1.0% phosphoric acid absorbent is proposed and has the advantages of simple operation, high sensitivity, and good accuracy. With no DC loss and degradation, the method may satisfy the request for DC determination in the air of workplace.
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双乙酰（diacetyl, DC），又称2,3-丁二酮、丁二酮，在食品烘焙和发酵过程中都会产生，具有黄油独特的风味，是一类非常重要的风味物质，工业上经常将人工合成的DC作为调味剂用于食品生产加工[1]。
DC具有高蒸气压使其具有高挥发性，在人工调味剂生产、使用或食品发酵酿造环境中，会产生高浓度的DC蒸气易被工作人员吸入。已有报道[2]表明暴露于DC的员工出现严重的呼吸系统疾病和肺功能下降，且高浓度DC会引起闭塞性细支气管炎[3]，这是一种罕见的、不可逆转的肺部疾病[4]，可对接触人员身体健康造成严重危害。
美国国家职业安全健康研究院（National Institute for Occupational Safety and Health, NIOSH）推荐[5]DC的短时间接触允许浓度（short-term exposure limit, STEL）为0.095 mg·m−3，8小时时间加权平均浓度（time-weighted average for up to 8 hours, 8 h-TWA）为0.019 mg·m−3，并提出了相应的实验室检测方法。NIOSH最早的监测方法，以（150/75 mg）活性炭采样-气相色谱/火焰离子化检测器检测空气中DC[6]，该法采样受现场环境湿度影响很大，检测值大大低于工作现场的真实浓度；针对这一缺陷，美国劳工部职业安全卫生管理局（Occupational Safety & Health Administration, OSHA）系列方法中的第1012号 [7]以及改进的方法[8]以串联绝对干燥的硅胶管、低流速进行采样，低浓度样品以O-(2,3,4,5,6-五氟苄基)羟胺盐酸盐衍生化36 h后以气相色谱-电子捕获检测器检测，获得较好效果。NIOSH研究人员进一步提出以串联硅胶采集、经解吸后以气相色谱/质谱检测[9]，方法检出限为1.1 ppb（即4.2 μg·m−3）。以上方法均存在采样要求苛刻、检测设备要求较高的问题。
我国尚未制定工作场所空气中DC的接触限值和标准检测方法，现行的《职业病危害因素分类和目录》中也没有将DC列为职业病危害因素，因此有必要研究工作场所空气中DC测定的标准检测方法，对职业卫生防护具有重要的现实意义。DC结构简单，直接以紫外检测器检测的响应非常低，无法实现准确检测。有害物质以气态、蒸气态或者气溶胶形式存在于空气中时，可将装有吸收液的吸收管作为样品收集器，当样品气流通过吸收液时，吸收液气泡中的有害物质分子迅速扩散到吸收液内，由于溶解或化学反应很快地被吸收液吸收，达到采集目的，可以基于此原理实现DC的溶液吸收法采集。4-硝基邻苯二胺（4-nitro-o-phenylenediamine, NPDA）作为一种精细化学品，已被广泛应用于合成2,3-二甲基-6-硝基喹喔啉类化合物（DC与NPDA缩合产物，简写为DC-NPDA）[10]。该化合物具有很强的紫外吸收性，相较于NPDA，其产物最大紫外吸收波长发生蓝移，可基于此反应实现DC的定量检测。因此本研究在文献[11]研究的基础上，提出以溶液吸收法采集DC，经NPDA衍生化得到单一产物DC-NPDA，再经高效液相色谱分离，紫外检测器检测，建立了工作场所空气中DC的检测方法。
1. 材料与方法
1.1 主要仪器与试剂
1260-Infinitty Ⅱ型高效液相色谱仪（美国Agilent）；色谱柱：SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；ME204/02万分之一分析天平（瑞士Mettler Toledo）；G560E漩涡振荡器（美国Scientific Industries）；纯水仪（美国Millipore）。
甲醇（色谱纯，美国Supelco）；DC（含量≥99%GC级，中国上海麦克林生化科技有限公司）；NPDA（含量≥98%，中国上海damas-beta公司）；磷酸（85%~90% HPLC级，中国上海麦克林生化科技有限公司）；吸收液（1.0%体积浓度，吸取磷酸10 mL，用二次去离子水稀释至1 L，备用）。实验用水均为二次去离子水。
1.2 样品采集、运输与保存
采样点位于香精香料生产车间，选取相关岗位进行短时间采样，用装有10.0 mL吸收液的多孔玻板吸收管，以0.2 L·min−1流量采集15 min空气样品，同时采集样品空白。采样后，立即封闭采样管两端，置于清洁容器内运输，4 ℃冰箱冷藏保存。
1.3 样品处理
样品在测定前用吸收管中的吸收液洗涤进气管内壁3次，全部转移至10 mL比色管中，加入0.10 mL NPDA的甲醇溶液（浓度为1.0 mg·mL−1），至60 ℃水浴中反应2 h。用0.45 μm针式滤器过滤后，取1 mL滤液至进样小瓶，待测。同时制备空白样品。于下述高效液相色谱条件测定，由校准曲线计算得DC浓度（μg·L−1）。
1.4 仪器条件
对参考文献[11]的方法进行适当改进，滤液进样量为20 μL，经SB-C18柱分离，柱温30 ℃，流动相为甲醇/水（体积比，65%/35%）混合液，流速为1.0 mL·min−1，紫外检测器波长为257 nm。
1.5 磷酸浓度选择
用系列浓度的磷酸溶液配制1000 μg·L−1 DC，考察磷酸浓度对衍生化的影响。本研究设计反应体系磷酸浓度依次为0.005、0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1、5、10%，按照样品进行处理，每个条件重复三次独立实验。
1.6 反应试剂比例选择
用1%磷酸溶液配制1000 μg·L−1的DC标准溶液，取10 mL分别加入不同体积的浓度为1.0 mg·mL−1的NPDA，使DC与NPDA物质的量比例为1∶1至1∶20，按照样品处理并进行实验。
1.7 反应温度和时间优化
用1%磷酸溶液配制1000 μg·L−1的DC标准溶液，分别取10 mL后再加入0.10 mL NPDA，按照样品处理。本研究采用3×9析因试验设计优化反应温度和时间，取27组样品分别按照温度（30、45、60 ℃）和时间（10、20、30、40、50、60、70、120、150 min）进行处理并进行试验。
1.8 绘制标准曲线
准确称取约1.0000 g DC，于棕色容量瓶中加1.0%磷酸定容至10 mL，再稀释配制成浓度为10.0 mg·mL−1的储备液，放于4 ℃冰箱中保存，可保存3个月。临用时再以吸收液稀释，配制浓度为0、5、50、250、750、1000、1500、2000 μg·L−1的DC标准系列工作液，再以“1.3”所述样品衍生条件处理并在“1.7”所述仪器条件下测定，外标法绘制标准曲线。
1.9 性能指标试验
取接近空白的DC吸收液按照“1.3”方法处理，连续测定11次，计算标准偏差，以3倍标准偏差计算本方法检出限和最低检出浓度，以10倍标准偏差计算本方法定量限和最低定量浓度。
以加标回收率来考察准确度，以相对标准偏差（relative standard deviation, RSD）来表示精密度。取18份空白吸收液分成3组，每组6份样品，分别加入DC标准溶液，制成低、中、高三种浓度加标样品，按“1.3”方法处理，当天测定计算加标回收率与批内精密度；在2~7 d内测定6次，代入当日制作的标准曲线计算含量，计算批间精密度。
1.10 采样效率试验
按“1.8”所述，用甲醇稀释配制10.0 mg·mL−1标准储备液。在5 L集气袋内加入一定量标准储备液用氮气稀释后，45 ℃烘箱放置半小时，配制高、中、低浓度的DC实验用气，串联三支分别装有10 mL吸收液的多孔玻板吸收管，以0.2 L·min−1的流量采样15 min，测定前、后管中DC浓度，计算采样效率。
1.11 样品稳定性试验
取30份空白吸收液分成5组，每组6份样品，分别加入DC标准溶液，制成浓度为600 μg·L−1加标样品，置于4 ℃保存，按“1.3”方法处理并测定当天及第3、5、7、14 d时样品浓度，计算下降率以表征样品的稳定性。
1.12 干扰试验和方法应用
在香精香料生产制造车间，可能存在DC前体物质乙偶姻和DC替代物2,3-戊二酮[5]，这两种物质与本研究使用的NPDA发生反应。吸收液中DC浓度为1000 μg·L−1时，将4倍浓度的乙偶姻和2,3-戊二酮标准溶液添加至吸收液中，按“1.3”方法处理并测定衍生化产物。
为验证方法实用性，利用所建立的方法采集并分析某香料制造车间3个岗位空气中DC浓度。
2. 结果
2.1 分离条件的选择
DC气体被磷酸溶液吸收后，由于氢键作用保持较长的稳定性。在320~600 nm 波长范围内扫描DC、NPDA及DC-NPDA溶液，在257 nm时DC的紫外吸收非常弱，NPDA及DC-NPDA衍生物均有较强紫外吸收，在选定的色谱条件下，NPDA保留时间为2.661 min，DC-NPDA衍生物的保留时间为6.025 min，表明本实验选择色谱条件下，衍生化试剂和产物能够有效分离，互不干扰，见图1。
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图 1 NPDA及DC-NPDA的标准色谱图a：空白；b：1000 μg·L−1 DC标准溶液。Figure 1. Chromatograms of NPDA and DC-NPDA2.2 衍生化反应磷酸浓度
结果如图2所示：在低浓度磷酸时DC的衍生化效率较低，至0.05%时衍生化效率逐渐升高，浓度为1.0%时衍生化效率最高，而后基本无变化。因此，为获得满意结果并较少后续调节体系pH的操作，本研究选择浓度1.0%磷酸溶液为采样吸收液，采集样品后直接进行衍生化。
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图 2 反应体系磷酸浓度对衍生化效率的影响Figure 2. Effect of acidity of solution on derivatization efficiency2.3 衍生化反应试剂比例
结果如图3所示：DC与NPDA两者反应比例在1∶1~1∶6之间，衍生化效率随着NPDA的增加而迅速升高，至1∶6时衍生化效率最高，然后基本保持不变。因此选择两者的反应比例为1∶6，即添加0.10 mL NPDA作为本研究衍生化试剂。
2.4 衍生化反应温度和反应时间
从图4可以看出，温度越高、反应时间越长，则衍生化效率越高。选择60 ℃作为反应温度，在60 min内，衍生化反应效率随时间增加而快速增加，延长反应时间衍生化产物增加缓慢，至2 h基本无变化。因此，本实验选择将吸收液在60 ℃时衍生化反应2 h。
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图 4 反应温度与时间对衍生化效率的影响Figure 4. Effects of reaction temperature and time on derivatization efficiency2.5 检出限与校准曲线
11份接近空白的DC吸收液处理后测定，经过计算，标准偏差为0.43 μg·L−1，以3倍标准偏差计算本方法检出限为1.3 μg·L−1，最低检出浓度为4.3 μg·m−3，以10倍标准偏差计算本方法定量限为4.3 μg·L−1，最低定量浓度为14.3 μg·m−3（以采样量为V0=3.0 L计）。在上述处理条件和仪器工作条件下，DC校准曲线范围为5~2000 μg·L−1，线性回归方程为A=0.184c−0.022，相关系数系数r为0.999 9，线性关系良好，满足检测要求。
2.6 回收率和精密度
实验结果见表1，空白吸收液未检出DC，三种加标质量浓度条件下的样品平均加标回收率为99.1%~100.8%，批内精密度为0.5%~3.0%，批间精密度为1.2%~2.0%，均小于10%，结果显示本方法回收率高，精密度良好，可以用于工作场所空气中DC的准确定量。
表 1 批内/批间精密度试验结果（n=6）Table 1. Intra-batch/inter-batch precision test results (n=6)加标浓度/(μg·L−1) 测定值
( $ \bar{x}\pm s $，μg·L−1)加标回收率/% RSD/% 批内 100 100.8±2.5 100.8 2.6 500 495.6±14.7 99.1 3.0 1000 1003.1±4.9 100.3 0.5 批间 200 199.7±4.0 99.9 2.0 600 602.0±6.9 100.3 1.2 1500 1507.8± 23.2 100.5 1.5 [注] RSD为相对标准偏差。 2.7 采样效率
从采气袋内采集实验用气，按本法测定前、后管中DC浓度，结果显示，高、中、低三种浓度DC实验用气采样效率分别为92.3%、96.3%、95.0%，计算平均采样效率为94.5%，采样效率较高，见表2。
表 2 采样效率测定结果Table 2. Sampling efficiency test results加入量/μg 采样体积/L 前管测定值/μg 后管测定值/μg 采样效率/% 0.2 3.0 0.19 0 95.0 3.0 3.0 2.89 0 96.3 12.0 3.0 11.08 0 92.3 2.8 样品稳定性
以600 μg·L−1为本组试验起始浓度，计算下降率。结果显示，样本在4 ℃冰箱保存14 d后，DC浓度下降仅2.8%，下降率＜10%，结果见表3。因此样品在4 ℃至少能保存2周。
表 3 DC样品稳定性试验结果Table 3. DC sample stability test results保存时间/d 测得浓度( $ \bar{x}\pm s $，μg·L−1) 下降率/% 3 599.5±10.8 0.1 5 597.2±9.4 0.5 7 588.9±4.4 1.9 14 583.0±3.3 2.8 2.9 干扰试验
在本实验优化的条件下，DC及干扰物的色谱分离如图5所示。由于乙偶姻与NPDA反应无喹喔啉环状结构，在本实验的色谱条件下未见衍生化产物吸收峰；2,3-戊二酮与NPDA反应生成两种同分异构体的喹喔啉环状产物，紫外吸收峰在t=10 min处，不干扰DC衍生化产物的出峰。因此，在优化的色谱条件下，可能存在的干扰物与被检测物能够完全分离，不干扰DC的测定。
2.10 实际样品测定
依照本法，分别采集原料配制、产品搅拌、成品包装3个岗位空气中DC，测定其浓度依次为5.86、6.37、8.85 mg·m−3。
3. 讨论
DC的化学性质活泼，是工业上合成喹喔啉环状化合物的原料之一，一般在催化剂作用下完成，且需要较高的反应温度、强酸性介质和较长的反应时间。使用高效液相色谱法检测DC，需将其衍生化处理增加发色基团，通常使用的衍生化试剂有邻苯二胺[12]以及苯环取代的4,5-二氯邻苯二胺[13]、4-甲氧基邻苯二胺[14]和NPDA[11]等，它们都具有灵敏度高、选择性好、在水溶液中完成反应的优点。NPDA在苯环上含硝基取代基团，这使其在紫外和可见光波段都具有更强的吸收性，使得衍生化反应生成的6 -硝基喹喔啉衍生物具有较强的紫外吸收，因此，以NPDA作为本研究的衍生化试剂。由于DC与NPDA反应是可逆反应，本研究优化了衍生化反应体系酸度、DC/NPDA的浓度比、反应温度和时间，确定了最佳条件。
本研究建立了一种以磷酸水溶液为吸收液、用多孔玻板吸收管采集、柱前衍生化-高效液相色谱测定工作场所空气中DC的方法。以溶液吸收法采集样品，避免了OSHA方法[8]中提到的采样现场环境湿度大影响固体吸附剂容量的影响，且使用职业病防治机构实验室普遍配置高效液相色谱-紫外检测器完成检测，大大提高了工作效率。本法最低检出浓度为4.3 μg·m−3（以采样体积V0=3.0 L计），表明本研究方法的性能达到NIOSH推荐检测方法[7]的要求。将本研究建立方法应用于香精生产企业车间采样，表明工作场所空气常见共存成分不干扰DC的测定。
DC未纳入国内职业病危害因素监测目录，本研究选取的香精生产企业工作场所空气DC浓度远高于NIOSH的限值，国内由DC致呼吸系统疾病已有报道[15]，提醒企业对其危害应引起引起重视，要加强工程防护措施，及时开展健康宣教，督促劳动者做好个人防护，预防职业病发生。相关职能部门也应尽快制定适用的职业健康接触限值和检测方法，完善职业健康检查项目及职业病诊断标准，督促监管部门加强监管，全面保障劳动者的健康。
本法各项指标均满足GB/Z 210.4—2008《职业卫生标准制定指南第4部分：工作场所空气中化学物质测定方法》的要求。与现有方法[7]相比，采样操作简单，样品稳定性好，分析速度快、重复性好、准确度高，兼具适用性和实用性，可以为工作场所空气中DC暴露的健康效应研究提供技术支持。
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图 1 NPDA及DC-NPDA的标准色谱图
a：空白；b：1000 μg·L−1 DC标准溶液。
Figure 1. Chromatograms of NPDA and DC-NPDA
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图 2 反应体系磷酸浓度对衍生化效率的影响
Figure 2. Effect of acidity of solution on derivatization efficiency
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图 4 反应温度与时间对衍生化效率的影响
Figure 4. Effects of reaction temperature and time on derivatization efficiency
表 1 批内/批间精密度试验结果（n=6）
Table 1 Intra-batch/inter-batch precision test results (n=6)
加标浓度/(μg·L−1) 测定值
( $ \bar{x}\pm s $，μg·L−1)加标回收率/% RSD/% 批内 100 100.8±2.5 100.8 2.6 500 495.6±14.7 99.1 3.0 1000 1003.1±4.9 100.3 0.5 批间 200 199.7±4.0 99.9 2.0 600 602.0±6.9 100.3 1.2 1500 1507.8± 23.2 100.5 1.5 [注] RSD为相对标准偏差。 
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表 2 采样效率测定结果
Table 2 Sampling efficiency test results
加入量/μg 采样体积/L 前管测定值/μg 后管测定值/μg 采样效率/% 0.2 3.0 0.19 0 95.0 3.0 3.0 2.89 0 96.3 12.0 3.0 11.08 0 92.3
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表 3 DC样品稳定性试验结果
Table 3 DC sample stability test results
保存时间/d 测得浓度( $ \bar{x}\pm s $，μg·L−1) 下降率/% 3 599.5±10.8 0.1 5 597.2±9.4 0.5 7 588.9±4.4 1.9 14 583.0±3.3 2.8
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[1] STAREK-ŚWIECHOWICZ B, STAREK A. Diacetyl exposure as a pneumotoxic factor: a review[J]. Rocz Panstw Zakl Hig, 2014, 65(2): 87-92.
[2] WANG J, KIM S Y, HOUSE E, et al. Repetitive diacetyl vapor exposure promotes ubiquitin proteasome stress and precedes bronchiolitis obliterans pathology[J]. Arch Toxicol, 2021, 95(7): 2469-2483. doi: 10.1007/s00204-021-03076-2
[3] AKPINAR-ELCI M, TRAVIS W D, LYNCH D A, et al. Bronchiolitis obliterans syndrome in popcorn production plant workers[J]. Eur Respir J, 2004, 24(2): 298-302. doi: 10.1183/09031936.04.00013903
[4] BARKER A F, BERGERON A, ROM W N, et al. Obliterative bronchiolitis[J]. N Engl J Med, 2014, 370(19): 1820-1828. doi: 10.1056/NEJMra1204664
[5] The National Institute for Occupational Safety and Health (NIOSH). Criteria for a recommended standard: occupational exposure to diacetyl and 2, 3-pentanedione[R/OL]. (2016-10-27)[2022-01-24]. https://www.cdc.gov/niosh/docs/2016-111/default.html.
[6] NIOSH. Diacetyl: Method 2557[EB/OL]. [2016-05-20]. http://www.cdc.gov/niosh/docs/2003-154/pdfs/2557.pdf.
[7] EIDE M E. Acetoin: Diacetyl (OSHA Method 1012)[EB/OL]. [2016-05-20]. https://www.osha.gov/sites/default/files/methods/osha-1012.pdf.
[8] SHAH Y C. Diacetyl (OSHA Method PV2118)[EB/OL]. [2016-05-20]. http://niosh.dnacih.com/nioshdbs/oshameth/t-pv2118/t-pv2118.html.
[9] LEBOUF R, SIMMONS M. Increased sensitivity of OSHA method analysis of diacetyl and 2, 3-pentanedione in air[J]. J Occup Environ Hyg, 2017, 14(5): 343-348. doi: 10.1080/15459624.2016.1252846
[10] JAFARPOUR M, REZAEIFARD A, DANEHCHIN M. Easy access to quinoxaline derivatives using alumina as an effective and reusable catalyst under solvent-free conditions[J]. Appl Catal A Gen, 2011, 394(1/2): 48-51.
[11] LI P, ZHU Y, HE S, et al. Development and validation of a high-performance liquid chromatography method for the determination of diacetyl in beer using 4-nitro-o-phenylenediamine as the derivatization reagent[J]. J Agric Food Chem, 2012, 60(12): 3013-3019. doi: 10.1021/jf3007163
[12] RAMOS R M, PACHECO J G, GONÇALVES L M, et al. Determination of free and total diacetyl in wine by HPLC−UV using gas-diffusion microextraction and pre-column derivatization[J]. Food Control, 2012, 24(1/2): 220-224.
[13] LANDAUD S, LIEBEN P, PICQUE D. Quantitative analysis of diacetyl, pentanedione and their precursors during beer fermentation by an accurate GC/MS method[J]. J Inst Brew, 1998, 104(2): 93-99. doi: 10.1002/j.2050-0416.1998.tb00981.x
[14] OJEDA A G, WROBEL K, ESCOBOSA A R C, et al. High-performance liquid chromatography determination of glyoxal, methylglyoxal, and diacetyl in urine using 4-methoxy-o-phenylenediamine as derivatizing reagent[J]. Anal Biochem, 2014, 449: 52-58. doi: 10.1016/j.ab.2013.12.014
[15] 胡博骅, 黄小萍, 余肖颦, 等. 双乙酰接触相关气道功能障碍2例[J]. 中华劳动卫生职业病杂志, 2023, 41(3): 222-224. HU B H, HUANG X P, YU X P, et al. Two cases of airway dysfunction related to diacetyl exposure[J]. Chin J Ind Hyg Occup Dis, 2023, 41(3): 222-224.
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